УДК: 616. 24-008.64+616.12-008:613.84:577.175.14:616.155.3
 
Орлова В. Д.

Кафедра внутренней медицины №3 (зав. – проф. А.А. Хренов) ГУ «Крымский государственный медицинский университет им. С. И. Георгиевского», г. Симферополь

 

ПЛАЗМIН-IНДУКОВАНИЙ СИНТЕЗ ПРОЗАПАЛЬНОГО
ЦИТОКIНА IL-1β МОНОНУКЛЕАРНИМИ ЛЕЙКОЦИТАМИ
ПРИ ХРОНIЧНIЙ СЕРЦЕВIЙ НЕДОСТАТНОСТI ТА ХРОНIЧНIЙ  ЛЕГЕНЕВIЙ НЕДОСТАТНОСТI У ХВОРИХ IЗ ТРИВАЛИМ СТАЖЕМ ТЮТЮНОПАЛIННЯ

Орлова В. Д.

 РЕЗЮМЕ

У хворих із ХЛН і ХСН вивчено рівень цитокінів у культуральному середовищі культури мононуклеарних лейкоцитів та встановлено, що тривалий стаж тютюнопаління характеризується підвищеним плазмiн-індукованим синтезом мононуклеарними лейкоцитами прозапального цитокіна IL-1β, що формує умови для хронізації і прогресування патологічного процесу.


Ключові слова
: тютюнопаління, плазмiн, цитокіни, хронічна легенева недостатність, хронічна серцева недостатність.
 

LONG-TERM EXPERIENCE OF TOBACCO SMOKING INFLUENCE ON PLASMIN-INDUCED SYNTHESIS OF IL-1β CYTOKINE BY MONONUCLEAR LEUKOCYTES AT PATIENTS WITH CHRONIC PULMONARY AND CHRONIC HEART INSUFFICIENCY.

Orlova V.D. 

SUMMARY
 
Cytokines level in cultural medium of mononuclear leukocytes kind was studied at patients with chronic pulmonary and chronic heart insuffitiency. Long-term smoking experience was determined to be charakterised by increased plasmin-induced synthesis of mononuclear leukocytes of proinflamatory IL-1β cytokine. This state forms the conditions for chronization and progression of pathological process. 
Key words: tobacco smoking, plasmin, cytokines, chronic pulmonary and chronic heart insufficiency.

В современной медицине всё актуальнее становится изучение хронических заболеваний и их осложнений на уровне субклинических реакций, вникая в глубины, а может быть и в основы прогрессирования заболевания. К одной из таких субклинических реакций относится цитокин-ассоциированная субклиническая системная воспалительная реакция. Данная реакция при многих заболеваниях внутренних органов (включая хроническое) активирует синтез широкого спектра цитокинов мононуклеарными лейкоцитами и клетками сосудистого эндотелия [5, 8], причем фибринолитический фермент-плазмин является одним из активаторов данного синтеза. Помимо прямого участия в реакциях сосудистого гемостаза, плазмин регулирует кинетику воспалительного процесса, процессы регенерации, ремоделирование тканей и др. [9, 10, 11].

 

В свою очередь, активации системы цитокинов отводится роль важного маркера прогрессирования как хронической сердечной недостаточности (ХСН), так и хронической легочной недостаточности (ХЛН), а коррекция цитокин-ассоциированных патогенетических механизмов открывает новые перспективы для повышения эффективности лечения этих заболеваний [4, 5, 7]. К важным факторам риска развития заболеваний сердечно-сосудистой и дыхательной систем, а также формирования дисбаланса цитокинового гомеостаза относится табакокурение [4, 7].
 
С учетом вышесказанного продолжение научного поиска по проблеме влияния табакокурения на плазмин-зависимую функциональную активность лейкоцитов у больных ХСН и ХЛН и оценка полученных фактов с позиции сано- и патогенеза представляется нам перспективным научным направлением, раскрывающим новые возможности дифференцированной терапии заболеваний.
 
Основной целью исследования явилось научное обоснование целесообразности коррекции дисбаланса цитокинового гомеостаза в комплексном лечении ХСН и ХЛН у лиц с длительным стажем табакокурения.
 
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
 
Обследовано 83 больных ХСН и ХЛН, разделенных на четыре группы: 1-я группа –20 больных ХСН, I-II ФК по NYHA без фактора курения в анамнезе, 2-я группа – 19 больных ХСН, I-II ФК по NYHA, стаж курения более 10 лет. В 3-ю группу вошли 22 больных ХЛН I-II степени без фактора курения в анамнезе, в 4-ю группу – 22 больных ХЛН I-II степени, стаж курения более 10 лет; Основной причиной развития ХЛН у больных 1-й и 2-й группы явилось хроническое обструктивное заболевание легких (ХОЗЛ), ХСН – различные формы ИБС.
 
Использован метод краткосрочных органных культур, обеспечивающий культивирование клеток in vitro по Лурия Е. А. [2], согласно которому обеспечиваются изоляция клеточных элементов от организма и условия, при которых в клетках могут поддерживаться обменные процессы и осуществляться некоторые функции, не требующие длительной пролиферации и многоэтапной дифференцировки. Культивация проводилась в присутствии антибиотиков (бензилпенициллина натриевой соли 1000 ЕД и стрептомицина сульфата 0, 01 г на 1 мл культуральной среды).
 
Изучение плазмин-индуцированного синтеза цитокинов в культуральных экспериментах проводилось с использованием преинкубации мононуклеарных лейкоцитов (выделенных из периферической крови на градиенте плотности фиколл/верографина) с раствором плазмина (готовят путем активации плазминогена стрептокиназой в объемных соотношениях 10 мл и 0, 2 мл соответственно в течение 10 минут [1]). Концентрацию цитокинов определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа. Для определения уровня TNF-a были использованы тест-системы ProCon ТОО «Протеиновый контур» (Россия).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
 
Результаты исследования динамики плазмин-индуцирован­ного уровня провоспалительного цитокина IL-1β в культуральной жидкости культуры мононуклеарных клеток больных 1-й, 2-й, 3-й и 4-й групп представлены в табл.

Таблица
Влияние табакокурения на плазмин-индуцирован­ный уровень IL-1β в культуральной среде краткосрочной культуры мононуклеарных клеток больных 1-й, 2-й, 3-й и 4-й групп в эксперименте in vitro, пг/мл культуральной среды

 
 
 
Примечание: р – достоверность различий, высчитанная в сравнении с соответствующим показателем у подобных больных без фактора курения в анамнезе.
 
Нами установлено (табл.), что длительный стаж табакокурения оказывает существенное влияние на плазмин-индуцирован­ный уровень синтез IL-1β мононуклеарными лейкоцитами: у больных ХСН синтез провоспалительного цитокина возрастает на 69, 8 % (р < 0, 001), у больных ХЛН – на 71, 8 % (р < 0, 001).
 
Известно, что механизм реализации гемодинамического и клинического влияния провоспалительных цитокинов при ХСН и ХЛН является предметом научной дискуссии. Так, при ХСН это влияние складывается по крайней мере из четырех ключевых составляющих [3]: отрицательного инотропного действия, ремоделирования сердца (необратимая дилатация полостей и гипертрофия кардиомиоцитов), нарушения эндотелий-зависимой дилатации артериол, усиления процесса апоптоза кардиомиоцитов и клеток периферической мускулатуры.

Причастность различных цитокинов к патогенезу ХОЗЛ постулируется многими исследователями [12]. Так, Barnes P. и Hansel T. (2004) указывают, что существующие протоколы лечения ХОЗЛ не приводят в достоверному снижению прогрессирования заболевания за счет недостаточного противовоспалительного влияния прежде всего на уровне мелких бронхов и на уровне паренхимы легких [6].

 
Можно предположить, что расшифровка плазмин-зависимых механизмов формирования дисбаланса цитокинового гомеостаза у лиц с длительным стажем табакокурения раскрывает новые возможности дифференцированной терапии ХСН и ХЛН.
 
ВЫВОД
 
У больных ХЛН (I-II степени), а также ХСН (I-II ФК по NYHA) с длительным (более 10 лет) стажем табакокурения в культуральной экспериментальной модели выявлен повышенный плазмин-индуцирован­ный синтез мононуклеарными лейкоцитами (целенаправленно мигрирующими in loko morbi) провоспалительного цитокина IL-1β, что формирует условия для хронизации/прогрессирования патологического процесса как в легких, так и на уровне тканей миокарда.
 
ЛИТЕРАТУРА

1.      Братчик А. М. Клинические проблемы фибринолиза / А. М. Братчик. – К. : Здоров’я, 1993. – 344 с.

2.      Лурия Е. А. Органные культуры кроветворной и лимфоидной ткани: автореф. дис. на здобуття наук. ступеня канд. мед. наук: спец. 03. 099. / Е. А. Лурия. – М. , 1972. – 37 с.

3.      Насонов Е. Л. Иммунопатология застойной сердечной недостаточности: роль цитокинов / Е. Л. Насонов, М. Ю. Самсонов, Ю. Н. Беленков, Д. Фукс. // Кардиология. – 1999. – № 3. – С. 66-73.

4.      Ребров А. П. Роль воспалительных и инфекционных факторов в развитии атеросклероза / А. П. Ребров, И. В.  Воскобой // Тер. архив. — 2004. — № 1. — С. 78 — 82.

5.      Тімченко О. Б. Клініко-імунологічне обгрунтування комплексної терапії хронічного обструктивного захворювання легенів у хворих, котрі перенесли туберкульоз легенів. – автореф. дис… канд. мед. наук – 14. 01. 27 пульмонологія. // Кримський республіканський науково-дослідний інститут фізичних методів лікування і медичної кліматології ім. І. М. Сеченова МОЗ України, Ялта, 2008. – 21 с.

6.      Bergeron C. , Tulic M. K. , Hamid Q. Tools used to measure airway remodelling in research // Eur. Respir. J. – 2007. — Vol. 29, N. 3. — P. 596-604.

7.      Chung K. F. Multifaceted mechanisms in COPD: inflammation, immunity, and tissue repair and destruction / K. F. Chung, I. M. Adcock // Eur. Respir. J. — 2008. – Vol. 31, N. 6. – P. 1334 — 1356.

8.      Mechanisms of cigarette smoke condensate-induced acute inflammatory response in human bronchial epithelial cells / G. R. Hellermann, S. B. Nagy, X. Koong [et al. ] // Respir. Res. — 2002. — Vol. 3. — P. 22 – 29.  

9.      Plasmin-dependent and -independent effects of plasminogen activators and inhibitor-1 on ex vivo angiogenesis / S. Brodsky, J. Chen, A. Lee et al. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. — 2001. – Vol. 281. – P. 1784-1792.

10. Plasminogen has a broad extrahepatic distribution / L. Zhang, S D. eiffert, B. J. Fowler et al. // Thromb. Haemost. — 2002. – Vol. 87. – P. 493-501.

11. Vassalli J. D. , Sappino A. P. , Belin D. The plasminogen activator/plasmin system // J. Clin. Invest. — 1998. – Vol. 88. – P. 1067-1072.

12. Yamagata T, Ichinose M. Agents against cytokine synthesis or receptors // Eur. J. Pharmacol. — 2006. — Vol. 8, N. 533(1-3). — P. 289-301.